1、流式细胞仪的核心在于它的三大组件：液路系统、光路系统以及电子系统。液路系统如精密的舞者，通过鞘液的压力，让单个细胞在管路中形成精准的单列移动，确保了数据的精确性和一致性，如图1所示。
2、单参数直方图 每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布，以直方图的方式来显示。在图中，横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度的值，其单位是道数（channel），可以是线形（line）或者对数（log）。
3、左边这张图每个峰下面积除以细胞数就是平均荧光强度，在流式细胞仪分析完结果后会出据平均荧光强度的数值，你可以看一下你的原始数据。
4、假设你在这个图前面的步骤都是对的，包括设置gate，单细胞的gate等等。这两个图不具备可比性，第一个的图记录了超过1万个数据，而第二个只有2千多个。相差的很远。这是最大的错误。从现有的百分率来看，G1， G2的百分率也很接近。所以是看不出差别来的。
5、你这个图横坐标代表的是相对荧光强度，纵坐标代表的是细胞计数。图的含义就是在每个荧光强度有多少细胞。估计你用了氧化敏感的荧光指针，ROS反应后荧光增加。所以你应该先用对照组设一个阈值，看实验组的荧光强度有没有高于或者低于该阈值。
1、市面上绝大多数的流式细胞仪都是以FCS文件格式保存数据的。以BD的机器为例，所使用的 DIVA软件，可以在右侧的列表中的每个实验，或者每个样本的上点右键，然后选中export，再选中export data，然后制定路径就可以导出了。
2、一）单参数直方图单参数直方图是一维数据用得最多的图形显示形式，既可用于定性分析，又可用于定量分析，形同一般X-Y平面描图仪给出的曲线。根据选择放大器类型不同，横坐标可以是线性标度或对数标度。用信道来表示，实质上是所测的荧光或散射光的强度。纵坐标一般表示的是细胞的相对数。
3、流式细胞术（flow cytometry， FCM）是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。
1、当然能导出了。有几个方法。如果你用的是BD的Diva软件，在记录所有数据后。在Experiment栏目上点右键，会有一个batch analysis的选项。点击后，会有几个结果输出选项，包括PDF打印。统计数据输出等等。你可以根据需要选择，并指定文件路径。就可以得到数据了。
2、有几个办法。一是用流式本身自带的分析软件，输出为图表的格式。二是直接把流式实验的原始数据从硬盘上直接拷贝，将来还是用分析软件打开，也可以用Excel打开，自行生成图表。
3、使用流式细胞仪采集所需的细胞数据。流式细胞仪软件中导出原始数据文件。使用适当的数据处理软件，如FlowJo、FCSExpress等，打开导出的数据文件，使用平滑算法对数据进行平滑处理，以生成平滑的曲线。
4、有很多网站有FCS的样本文件可以下载 比如 FlowRepository 还有杜克大学流式细胞仪的数据库 百度不许贴链接，你可以Google搜一下关键词fcs sample file。免费的软件也有不少，你也可以同样搜一下。
5、FlowJo，创新的数据解析专家，是科研人员的得力助手，它以卓越的性能和全面的功能，引领着流式细胞分析的新纪元。FlowJo的兼容性堪称卓越，它是一个 统一的解决方案，无缝对接所有采集软件和细胞仪的数据文件，无论你的实验设备如何，都能轻松驾驭。
1、最常见的是分析CD4， CD8亚群。先在FSC， SSC散点图上划出淋巴细胞gate。然后在此gate基础上选取T细胞标志染色阳性的细胞群（一般是CD3）。在把CD34阳性的细胞根据CD4 和CD8染色情况形式为散点图，得到CD4+/CD8-， CD4-/CD8+， 以及双阳性的比率。如果还有其他细胞标志的染色，再进一步分析。
2、先在FSC/SSC散点图gate出淋巴细胞；然后把淋巴细胞显示到柱状图，gate出CD3阳性的（T细胞）；再把T细胞显示到散点图，横坐标，纵坐标分别为CD4和CD8。
3、样本用CD3， CD4， CD8等T细胞特异性的抗体染色，并做好compensation。
4、因此，T淋巴细胞亚群的检测对控制这些疾病的发生发展、了解疾病的机制、指导临床治疗都有极其重要的意义。目前，最为快速和准确的T细胞亚群的检测方法是流式细胞术荧光标记法，即用抗人T细胞表面分化抗原的单克隆抗体进行免疫荧光标记，通过流式细胞仪检测T淋巴细胞各亚群的百分率或绝对计数。
流式上机流程不包括以下步骤：样本制备：在流式上机之前，需要将待测样本进行适当的处理和制备，以满足流式细胞仪的检测要求。这一步通常包括细胞的洗涤、染色、固定等操作。样本加载：将制备好的样本加入到流式细胞仪中，准备进行检测。这一步需要确保样本的加入量适当，以获得准确的检测结果。
胞内染色：加入IFN-gamma；或IgG1的抗体20l，混匀，室温避光30分钟。加入2ml PBS，1000转，离心5分钟，弃上清。加入PBS 500l。上机前4度保存。1上机检测。
上机后先用抗体对照组设置阴性Gate。 检测样本。